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凱氏定氮儀測豆奶粉中蛋白質(zhì)含量方法

更新時間:2017-08-28      點擊次數(shù):3306
蛋白質(zhì)測定的國標(biāo)規(guī)定方法——用凱氏定氮儀介紹
 
  【GB/T 5009.5—1985】
 
  食品中蛋白質(zhì)的測定方法
 
  本標(biāo)準(zhǔn)適用于各類食品中蛋白質(zhì)的測定。
 
  1 原理
 
  蛋白質(zhì)是含氮的有機化合物。食品與硫酸和催化劑一同加熱消化,使蛋白質(zhì)分解,分解的氨與硫酸結(jié)合生成硫酸銨。然后堿化蒸餾使氨游離,用硼酸吸收后再以硫酸或鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定,根據(jù)酸的消耗量乘以換算系數(shù),即為蛋白質(zhì)含量。
 
  2 試劑
 
  所有試劑均用不含氨的蒸餾水配制。
 
  2.1 硫酸銅。
 
  2.2 硫酸鉀。
 
  2.3 硫酸。
 
  2.4 2%硼酸溶液。
 
  2.5 混合指示液:1份0.1%甲基紅乙醇溶液與5份0.1%溴甲酚綠乙醇溶液臨用時混合。也可用2份0.1%甲基紅乙醇溶液與1份0.1%次甲基藍乙醇溶液臨用時混合。
 
  2.6 40%氫氧化鈉溶液。
 
  2.7 0.05N硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液或0.05N鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液。
 
  3 儀器
 
  定氮蒸餾裝置:如圖所示。
 
  (圖略)
 
  4 操作方法
 
  4.1 樣品處理:精密稱取0.2~2.0g固體樣品或2~5g半固體樣品或吸取10~20ml液體樣品(約相當(dāng)?shù)?0~40mg),移入干燥的 100ml或500ml定氮瓶中,加入0.2g硫酸銅,3g硫酸鉀及20ml硫酸,稍搖勻后于瓶口放一小漏斗,將瓶以45°角斜支于有小孔的石棉網(wǎng)上。小心加熱,待內(nèi)容物全部炭化,泡沫*停止后,加強火力,并保持瓶內(nèi)液體微沸,至液體呈藍綠色澄清透明后,再繼續(xù)加熱0.5h。取下放冷,小心加20ml 水。放冷后,移入100ml容量瓶中,并用少量水洗定氮瓶,洗液并入容量瓶中,再加水至刻度,混勻備用。取與處理樣品相同量的硫酸銅、硫酸鉀、硫酸按同一方法做試劑空白試驗。
 
  4.2 按圖裝好定氮裝置,于水蒸氣發(fā)生瓶內(nèi)裝水至約2/3處,加甲基紅指示液數(shù)滴及數(shù)毫升硫酸,以保持水呈酸性,加入數(shù)粒玻璃珠以防暴沸,用調(diào)壓器控制,加熱煮沸水蒸氣發(fā)生瓶內(nèi)的水。
 
  4.3 向接收瓶內(nèi)加入10ml 2%硼酸溶液及混合指示液1滴,并使冷凝管的下端插入液面下,吸取10.0ml樣品消化稀釋液由小玻杯流入反應(yīng)室,并以10ml水洗滌小燒杯使流入反應(yīng)室內(nèi),塞緊小玻杯的棒狀玻塞。將10ml 40%氫氧化鈉溶液倒入小玻杯,提起玻塞使其緩緩流入反應(yīng)室,立即將玻塞蓋緊,并加水于小玻杯以防漏氣。夾緊螺旋夾,開始蒸餾。蒸氣通入反應(yīng)室使氨通過冷凝管而進入接收瓶內(nèi),蒸餾5min。移動接受瓶,使冷凝管下端離開液面,再蒸餾1min。然后用少量水沖洗冷凝管下端外部。取下接收瓶,以0.05N硫酸或0.05N鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至灰色或藍紫色為終點。
 
  同時吸取10.0ml試劑空白消化液按4.3操作。
 
  4.4 計算
 
  式中:X——樣品中蛋白質(zhì)的含量,%;
 
  V1——樣品消耗硫酸或鹽酸標(biāo)準(zhǔn)液的體積,ml;
 
  V2——試劑空白消耗硫酸或鹽酸標(biāo)準(zhǔn)液的體積,ml;
 
  N——硫酸或鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的當(dāng)量濃度;
 
  0.014——1N硫酸或鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液1ml相當(dāng)于氮克數(shù);
 
  m——樣品的質(zhì)量(體積),g(ml);
 
  F——氮換算為蛋白質(zhì)的系數(shù)。蛋白質(zhì)中的氮含量一般為15~17.6%,按16%計算乘以6.25即為蛋白質(zhì),乳制品為6.38,面粉為5.70,玉米、高粱為6.24,花生為5.46,米為5.95,大豆及其制品為5.71,肉與肉制品為6.25,大麥、小米、燕麥、裸麥為5.83,芝麻、向日葵為 5.30。
 
  附加說明:
 
  本標(biāo)準(zhǔn)由全國衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)委員會食品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)分委員會提出,由衛(wèi)生部食品衛(wèi)生監(jiān)督檢驗所歸口。
 
  本標(biāo)準(zhǔn)由衛(wèi)生部食品衛(wèi)生監(jiān)督檢驗所負(fù)責(zé)起草。
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